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如何正確使用熒光分光光度計是一個很重要的問題
更新時間:2021-05-17   點擊次數(shù):1165次
  如何使用熒光分光光度計是一個很重要的問題,那么今天就讓我們一起來了解一下具體該如何使用吧。
 
  一、硬件操作
 
  熒光分光光度計在使用時,需要注意開機次序,以保護設備之間不受影響。熒光光譜儀開機順序一般為先開氙燈,然后開儀器主機,最后開跟儀器連接的計算機。
 
  如此操作的原因在于穩(wěn)態(tài)氙燈是高壓點亮,為了避免瞬問脈沖電流對周圍設備造成影響,需要先開氙燈,等電流穩(wěn)定后再打開周邊的電腦等設備。關機順序則相反。
 
  二、軟件操作
 
  熒光定量分析多采用工作曲線法,即以已知量的標準物質(zhì),按試樣相同方法處理后,配成一系列標準溶液,測定其相對熒光強度和空白溶液的相對熒光強度;
 
  扣除空白值后,以熒光強度為縱坐標,標準溶液濃度為橫坐標,繪制工作曲線;然后將處理后的試樣配成一定濃度的溶液,在同一條件下測定其相對熒光強度,扣除空白值后,從工作曲線上求出熒光物質(zhì)的含量。
 
  在用熒光分析法測定某些會引起熒光改變的微量物質(zhì)時,常采用差示熒光法,可使熒光強度的讀數(shù)差距拉大,使熒光強度的降低加大,從而提高方法的靈敏度和準確度。
 
  下面以日立F-4500熒光分光光度計的使用為例,具體介紹如何在儀器上進圖譜掃描、濃度分析等定性、定量測試操作。
 
  1.圖譜掃描(WavelengthScarl)簡明操作:
 
  ①打開光譜儀電源開關(POwER),5s后再按下氙燈點燈按鈕,當氙燈點燃后,再接通主開關(MAIN)。此時主開關上方綠色指示燈連續(xù)閃動三下,然后開計算機、顯示器、打印機。計算機進入操作系統(tǒng)。
 
 ?、谶\行FL-Solution控制軟件。
 
 ?、劢⒃囼灧椒?發(fā)射光譜),設置測量參數(shù):點擊快捷欄“Method”后,立即顯示了分析方法(AnalysisMethod)的五個重疊界面,分別為“常規(guī)”(Gen—eral)、“儀器條件”(Instnlinent)、“模擬畫面”(Mmlitor)、“處理”(Processing)、“報告”(Report)。
 
  下面詳細介紹每個界面:單擊“常規(guī)”按鈕,測量方式選擇波長掃描Wave一1ength);單擊“儀器條件”按鈕,掃描方式選為發(fā)射波長掃描。
 
  激發(fā)波長的輸入范圍為200~900nm,發(fā)射起始波長的輸入范圍200~890nm,發(fā)射終止波長的輸入范圍210~900nm。選定合適的掃描速度、延遲時間、發(fā)射單元狹縫、光電倍增管負高壓,設置發(fā)射單元狹縫、響應速度、重復次數(shù)等參數(shù)。
 
 ?、苓M行樣品掃描:將待測樣品倒人四面通光的石英比色皿中,并將其放入儀器的樣品架中。點擊測量按鈕,儀器便開始對樣品進行掃描測量。
 
  ⑤存儲掃描譜圖:在文件菜單“另存為”,輸入文件名,按“保存”將數(shù)據(jù)保存。
 
  ⑥打印譜圖:打印樣品掃描譜圖。
 
 ?、邷y試結束,將比色皿取出,清洗,晾干。退出軟件,關閉計算機,在軟件上將氙燈熄滅,待其冷卻到室溫時才關光譜儀主機。
 
  注意:測試結束不要急于關閉光譜儀主機電源。務必等到氙燈冷卻后,才關光譜儀主機。可以將手放在儀器主機上面左側(cè)的散熱窗口處,感受其溫度,直到其溫度降到室溫時,才能關閉光譜儀主機。
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