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關于液相色譜儀的操作注意事項都在這里
更新時間:2020-10-23   點擊次數(shù):1458次
  液相色譜儀對于多數(shù)人來說都是很好上手的儀器了,但是就算是用過幾年、經(jīng)驗豐富的分析員都會習慣于一些錯誤的操作(師傅教錯了?),經(jīng)常導致一些儀器故障。方便快捷的分析過程固然重要,但是為了多做樣品而忽略了一些*的步驟,往往得不償失,哪些操作不能做呢?下面就讓我們一起來了解一下吧。
 
  1、流動相不過濾
 
  因為塵?;蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相好在玻璃容器內(nèi)蒸餾,而常用的方法是濾過,可采用Millipore濾膜(0.2μm或0.45μm)等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應經(jīng)常清洗或更換。
 
  2、使用后沒有及時清洗泵
 
  流動相不應含有任何腐蝕性物質(zhì),含有緩沖液的流動相不應保留在泵內(nèi),尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下。如果將含緩沖液的流動相留在泵內(nèi),由于蒸發(fā)或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。
 
  因此,必須泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
 
  3、流動相走空
 
  泵工作時要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完,否則空泵運轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、缸體或密封環(huán),終產(chǎn)生漏液。
 
  4、沒有流動相流出,又無壓力指示怎么辦?
 
  可能是泵內(nèi)有大量氣體,這時可打開泄壓閥,使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉(zhuǎn),將氣泡排盡,也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環(huán)磨損,需更換。
 
  5、壓力和流量不穩(wěn)了?
 
  原因可能是氣泡,需要排除;或者是單向閥內(nèi)有異物,可卸下單向閥,浸入丙酮內(nèi)超聲清洗。有時可能是砂濾棒內(nèi)有氣泡,或被鹽的微細晶?;蜃躺奈⑸锊糠侄氯@時,可卸下砂濾棒浸入流動相內(nèi)超聲除氣泡,或?qū)⑸盀V棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)內(nèi)迅速除去微生物,或?qū)Ⅺ}溶解,再立即清洗。
 
  6、壓力為啥過高或過低?
 
  可能是是管路被堵塞,需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏。檢查堵塞或泄漏時應逐段進行。
 
  在進行梯度洗脫時,由于多種溶劑混合,而且組成不斷變化,因此帶來一些特殊問題,必須充分重視:
 
  PS:(在液相色譜中對組分復雜的樣品采用梯度洗脫的方法。在同一個分析周期中,按一定程序不斷改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫。從而可以使一個復雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。
 
  梯度洗脫的優(yōu)點:1.縮短分析周期;2.提高分離能力;3.峰型得到改善,很少拖尾;4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。)
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